哪些做ELISA实验时常常存在脑子里的疑问

　　客户常见问题;

　　1,待测收费标准 ？

　　答：凡是在本公司购买都是免费待测的。

　　2：不同批号的可以一起用么？

　　答：不同批号的是不可以混用的

　　3 ELISA实验反应时间不同是由什么决定的？

　　答：抗原与抗体、抗体与酶标抗体反应一般在37℃ 2h～3h达到高峰。时间太短,敏感性下降,时间太长,吸附的抗原或复合物(在这个温度下)可能脱落。酶底物反应时间的确定：一般采用15min～30min～45min。也可以标准阳性血清为准,随时测定其OD值,当达到规定的OD值时,即终止反应

　　。

　　4显色淡，灵敏度偏低可能原因及解决方法？

　　我们在做实验时，常会遇到度偏低的问题，以下是根据不同问题可能原因及其防止方法总结，仅供参考：

　　可能原因及防止方法：

　　1．孵育反应时间不足

　　定时钟定时

　　2．洗涤时冲击力太大，洗涤液浸泡时间太长，洗涤次数增加

　　减少洗涤冲击力，按说明书要求保留洗涤时间，记住洗涤次数

　　3．显色剂滴加量不足或顺序颠倒，或混合后加入

　　滴加显色液时，滴瓶垂直向下，持力均匀，滴速不宜过快，先加显色剂 A，反加显色剂B，不可将A、B液混合后加入

　　4．显色剂反应时间不足

　　定时

　　5．蒸馏水水质有问题

　　测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响

　　6．试剂盒在运输途中时间太长，温度太高

　　试剂盒置保温箱内运输，并放足够数量的冰块，尽量缩短运输时间

　　7．试剂、样品用前未能平衡

　　用前试剂、样品置室温平衡 30分钟左右。

　　8．样品和NaN 3 防腐，抑制了酶的反应

　　样品不能加 NaN 3 防腐

　　9．试剂盒超过有效期

　　超过效期试剂盒不要使用

　　10．试剂开启时间过长长菌

　　试剂开启后请尽量在短时间内用完

　　11．移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸头内壁挂液太多或内壁不清洁

　　校正移液器，吸头要配套，每次装吸头要吻合紧密。移液不宜过快，排放应*。吸头内壁要清洁，一次性使用。

　　12．恒温箱温度不足37℃或水浴锅水温度不足37℃）

　　放入反应板时注意培养箱温度，及时调整，孵育反应期间开启不宜太多，影响温度平衡。