做小鼠免疫球蛋白M实验中，需要注意什么？

小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：0.1ng/ml - 4ng/ml

使用目的：

本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白 M(IgM)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠免疫球蛋白 M(IgM)水平。用纯化的抗原包

被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白 M(IgM)，再与 HRP 标记

的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB

在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中

的免疫球蛋白 M(IgM)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标

准曲线计算样品中小鼠免疫球蛋白 M(IgM)浓度。

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的

OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出

标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其性，以避免试验误差。一次加样时间

控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD

值大于标准品孔D一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，

计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6 个月